灭菌消毒方法是什么？

采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施，称为灭菌。灭菌常用的方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。可根据不同的需求，采用不同的方法，如培养基灭菌一般采用湿热灭菌，空气则采用过滤除菌。

灭菌的定义

灭菌(Sterilization)是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。经过灭菌处理后，未被污染的物品，称无菌物品。经过灭菌处理后，未被污染的区域，称为无菌区域。[2]

《医院感染管理办法(卫生部令第48号)》(2006)

第七章 附则

第三十六条 本办法中下列用语的含义：

(五)灭菌：杀灭或者消除传播媒介上的一切微生物，包括致病微生物和非致病微生物，也包括细菌芽胞和真菌孢子。

同时，灭菌可以看成是一个过程，所以在《GBT19974-2005 医疗保健产品灭菌 灭菌因子的特性及医疗器械灭菌工艺的设定、确认和常规控制的通用要求》中有如下定义：

3.25 灭菌 sterilization 用来使产品无存活微生物的过程

灭菌消毒方法是什么

消毒具有杀死致病微生物的作用或方法，称为消毒。灭菌指彻底杀菌，即用物理或化学等方法，杀死物体上的一切微生物，以及它们的芽胞和孢子，使物体成为无菌状态。常用消毒和灭菌方法(一)物理灭菌方法通过高潮、射线、微波以及器械进行灭菌或除菌的方法均为物理灭菌方法。1、热力灭菌利用高潮杀死微生物的方法，称为热力灭菌。热力灭菌经常使用两个杀菌指数：热死温度和热死速度。热力灭菌经济有效，简便易行，是最普遍采用的方法，它可以分为湿热灭菌和干热灭菌两种。(1)湿热灭菌指利用热蒸汽杀死微生物。常用湿热灭菌方法圾如下几种。A.高压蒸汽灭菌法 利用高温高压蒸汽进行灭菌的方法。高压蒸汽灭菌可以杀死一切微生物，包括细菌的芽孢，真菌的孢子或休眠体等耐高温的个体。灭菌的蒸汽温度随蒸汽压力增加而升高，增加蒸汽压力，灭菌的时间可以大大缩短。因此它是一种最有效的、使用最广泛的灭菌方法。使用高压蒸汽灭菌时，应注意以下几点：a、灭菌锅内的冷气必须排尽。 b、灭菌锅内的培养基必须排列疏松，使蒸汽畅通。 c、灭菌完毕，应缓慢减压。 d、注意棉塞防湿。B.常压蒸汽灭菌法采用自然压力的蒸汽进行灭菌的方法。利用常压蒸汽灭菌时，灭菌物品在灭菌锅内排列不能过密，要保证蒸汽能在锅内均匀地流通。流通蒸汽的温度一般为100℃左右，要杀死耐热性的芽胞， 必须延长灭菌时间，一般为6-8小时。这种专用流通蒸汽灭菌灶的最大优点是：容量大， 结构简单，成本低廉，可自行建造。缺点是灭菌时间长，能源消耗量大，稍不注意就有灭菌不彻底的现象发生。C.间歇灭菌法指间歇一定时间，连续消毒几次� �到灭菌的方法。此方法运用于不耐高温的(100℃左右)培养基的灭菌。欲杀死培养基的芽胞， 可将其在流通蒸汽中消毒20-30分钟,先杀死其中的营养体细胞,然后将培养基在室温或温箱中培养,使芽孢发芽长成营养体,再用流通蒸汽消毒20-30分钟,杀死新长成的营养体细胞,这样连续3次,即可杀死培养基中的全部芽孢,达到无菌状态。(2)干热灭菌采用灼烧或干热空气灭菌，称为干热灭菌。干热灭菌主要有两种类型。A.火焰灭菌法 即通过火焰高温灼烧进行灭菌的方法。B.干热灭菌法即利用加热的高温空气进行灭菌的方法。2、辐射灭菌利用辐射产生的能量进行杀菌的方法，称之辐射灭菌。生产上应用辐射灭菌方法主要是指此外线灭菌。3、过滤除菌是利用机械的阻留方法来除去介质中的微生物。(二)化学灭菌方法利用化学药品灭菌或创造一个无菌环境，也是非常重要的灭菌手段。许多公演药品可使菌体蛋白质变性，有的可阻碍微生物的某一代谢环节。因此，化学药品可超到杀菌作用或抑菌作用。直接加入培养基能起灭菌作用，又不影响培养基成分的化学药品并不多，根据报道β-丙烷内酯(BPL)和焦碳酸二乙酯(PKE)具有这种作用，但应用甚少。有的具有杀菌和抑菌作用，但加入培养基后阻碍了香菇菌丝体生长发育，也不能被采用。香菇生产中常用的化学药品及具体使用方法如下。 1、甲醛的杀菌机理是具有强还原作用。 2、硫磺及其熏蒸灭菌方法 3、乙醇类乙醇又称为酒精。70-80%乙醇的杀菌能力较强。 4、酚及其衍生物常用的是石碳酸，又名苯酚，纯品为无色或白色针状、块状或三棱形晶体，溶于水，具特殊气味。浓石碳酸能使皮肤变白、手指麻痹并可损坏皮肤与粘膜，对人畜有毒。0.5-1%的石碳酸水溶液作为喷雾剂处理无菌室(箱), 能起到降尘除菌、空气消毒的作用;也可用3-5%的石碳酸水溶液对器械浸泡消毒。在5%石碳酸水溶液中若加入0.85-0.9%的食盐则可增加石碳酸药效,如有乙醇存在时, 则药效大减。 5、石灰与碱类石灰分为生石灰(CaO)与熟石灰(Ca(OH)2)两种。起杀菌作用的是熟石灰中的氢氧根离子，能水解蛋白质和核酸，使微生物的酶系和结构受到损害，并能分解菌体中的糖类。 6、氧化剂与还原剂高锰酸钾、过氧化氢、卤素(氯、溴、碘)及某些化合物(或络合物)，如漂白粉等均为氧化剂，可以杀菌。亚硫酸及亚硫酸盐等均为还原剂，能通过氧化还原反应起到杀菌作用。 7、重金属类一些重金属及其化合物，可使微生物的蛋白合成受破坏，亦可导致酶失活及取代细胞结构上的主要元素，使微生物生长受掏或导致死亡。 8、表面活性剂具有降低表面张力的物质称为表面活性剂。常用的肥皂与十二烷基磺酸钠类(如洗衣粉)的杀菌能力相当于石碳酸的2-3倍。 9、气雾消毒盒

灭菌的基本要求

重复使用的诊疗器械、器具和物品，使用后应先清洁，再进行消毒或灭菌。

被朊病毒、气性坏疽及突发不明原因的传染病病原体污染的诊疗器械、器具和物品，应执行WS/T 367第11章的规定。

耐热、耐湿的手术器械，应首选压力蒸汽灭菌，不应采取化学消毒剂浸泡灭菌。

环境与物体表面，一般情况下先清洁，再消毒;当受到患者血液、体液等污染时，先去除污染物，再清洁与消毒。

医疗机构消毒工作中使用的消毒产品应经卫生行政部门批准或符合相应标准技术规范，并应遵循批准使用的范围、方法和注意事项。

灭菌的微生物

将物体上的所有微生物包括细菌芽孢全部杀死或除去的措施。灭菌的方法有加压灭菌、紫外线照射灭菌、过滤除菌和化学药剂灭菌。加压灭菌是在密封的高压蒸气锅中进行的。当锅里的蒸气压力上升到1.05公斤/平方厘米时，蒸汽温度可达121℃。在此高温下，连续20分钟，可将微生物，包括细菌芽孢全部杀死。紫外线照射可引起微生物细胞DNA同一链上相邻的两个胸腺嘧啶形成二聚体，导致微生物的变异或死亡。过滤除菌是用细菌漏斗除去液体物质中的真菌、细菌等微生物的方法。有些物质如酶、维生素、糖类、蛋白质、有些毒素等由于不耐热，用加热等方法处理极易变质，可用此法除去微生物。化学药剂灭菌是用一些化学物质杀死微生物。常用的化学药剂有环氧乙烷等。环氧乙烷是一种化剂，能使酶等烷化而杀死微生物。

应用灭菌技术可对接种室、玻璃器皿、发酵罐、培养皿等进行灭菌，而这是进行微生物学研究和微生物工业生产所不可缺少的。灭菌技术也可用于医学上手术器械等的灭菌。19世纪，法国厨师阿贝首先发现密封的果汁经煮沸后可长期保存，后采用加压灭菌方法生产罐头食品，使罐头食品的生产有了可靠的卫生保证。化学灭菌剂环氧乙烷等还用于宇宙飞船等的灭菌。

灭菌的种类

用理化方法杀死一定物质中的微生物的微生物学基本技术。灭菌的彻底程度受灭菌时间与灭菌剂强度的制约。微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的技术。

热灭菌法

利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性，酶活性消失，致使细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。

干热灭菌：直接利用火焰将微生物烧死(如烧接种环、载玻片和试管口等)。不能用火焰灭菌的物品则利用热空气灭菌,将物品放在烘箱� ��加热到160～170℃,持续90分钟，此法适用于玻璃、金属和木质的器皿。

湿热灭菌：以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌。巴氏灭菌法就是湿热灭菌，此法有两种方式，①低温长时间处理：在61.7～62.8℃下处理30分钟;②高温短时间处理：在71.6℃或略高温度下处理15分钟。在上述诸法中，以蒸气加压灭菌效果最好，可用常压蒸气灭菌，也可在高压蒸气锅中(一般使用1千克/厘米2 )灭菌,其蒸气温度可达121℃,能将耐热的芽孢在30分钟内全部杀死。但对某些易被高压破坏的物质，如某些糖或有机含氮化合物，宜在0.6千克/厘米2 压力下(110℃)灭菌15～30分钟。

间歇灭菌：连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法。此法适用于不能耐 100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。一般是在正常大气压下用蒸气灭菌 1小时。灭菌温度不超过100℃,不致造成糖类等物质的破坏，而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死，从而达到彻底灭菌的目的。

辐射灭菌

在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。较常用的有紫外线，其他还有电离辐射(射线加快中子等)。波长在25000～80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效。辐射灭菌法仅限于某一定材料，因所需设备复杂，难于广泛使用。

渗透压灭菌

利用高渗透压溶液进行灭菌的方法。在高浓度的食盐或糖溶液中细胞因脱水而发生质壁分离，不能进行正常的新陈代谢，结果导致微生物的死亡。

化学试剂灭菌

大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化学灭菌剂必须有挥发性，以便清除灭菌后材料上残余的药物。