黄曲霉素中毒 黄曲霉菌的检测方法,黄曲霉菌的中毒诊断

黄曲霉素为真菌毒素，主要损害人体肝脏及肾脏，有较强的致癌性。黄曲霉素中毒临床上主要表现为厌食、呕吐、胃肠道出血等。黄曲霉素主要由黄曲霉和寄生曲霉产生，其基本结构中都含有二呋喃环和双香豆素，根据其细微结构的不同可分为B1，B2，G1，G2，M1，M2等多种，B1，B2在紫外光照射下为蓝色，G1，G2为绿色荧光，其中黄曲霉毒素B1毒性最强，且具有强烈致癌性，黄曲霉毒素主要损害肝脏，表现为肝细胞核肿胀，脂肪变性，出血，坏死及胆管上皮，纤维组织增生，同时肾脏也可受损害，主要表现为肾曲小管上皮细胞变性，坏死，有管型

一、黄曲霉菌的特性

　　1、黄曲霉菌的毒性极强

　　远远高于*、砷化物和有机农药的毒性，其中以B1毒性最大。当人摄入量大时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄人，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。AFT的致癌力也居首位，是世界上最强致癌物之一。

2、黄曲霉菌具耐热性

　　一般烹调加工温度不能将其破坏，裂解温度为1535℃。在水中溶解度较低，溶于油及一些有机溶剂，如*和甲醇中，但不溶于*、石油醚及乙烷。

3、食品中所污染的主要是黄曲霉毒素B1，其毒性一般认为有三种临床特征;急性中毒、慢性中毒和致癌性：

　

　(1)急性中毒：

它是一种剧毒物质，毒性比KCN大300倍，仅次于钚，是目前已知霉菌中毒性最强的。它的毒害作用，无论对任何动物，主要变化是肝脏，呈急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。脾脏和胰脏也有重度的病变。

(2)慢性中毒：

长期摄入小剂量的黄曲霉毒素则造成慢性中毒。其主要变化特征为肝脏出现慢性损伤，如肝实质细胞变性、肝硬化等。出现动物生长发育迟缓，体重减轻，母畜不孕或产仔少等系列症状

(3)致癌性：

黄曲霉菌是目前所知致癌性最强的化学物质

　　黄曲霉菌致癌特点是：

　　A 致癌范围广，能诱发鱼类、禽类，各种实验动物、家畜及灵长类等多种动物的实验肿瘤;

　　B 致癌强度大，其致癌能力比六氯环己烷大300万倍;

　　C 可诱发多种癌，AFT主要诱发肝癌，还可话互胃癌、肾癌、泪腺癌、直肠癌、乳腺癌，卵巢及小肠等部位的肿瘤，还可出现畸胎。

二、黄曲霉菌的霉菌毒素

产毒菌及其特性

　　1.黄曲霉菌黄曲霉菌属真菌门、半知菌亚门丛梗孢科曲霉属。本菌为需氧菌，最适温度30～33℃，相对湿度80-90%为最佳条件。花生、玉米、大米和小麦是其较好的生长基质。

　　2.寄生曲霉寄生曲霉也是产生AFT的主要菌株，其特性与黄曲霉类似。我国分布较少。

　　3.其他青霉、毛霉和根霉等真菌也能产生AFT，但产毒量甚微，其特性与黄曲霉类似。

　

　对食品的污染

　　黄曲霉菌(AFT)是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。

　　它们在紫外线照射下能产生荧光，根据荧光颜色不同，将其分为B族和G族两大类及其衍生物。AFT已发现20余种。

　　黄曲霉菌主要污染粮油食品、动植物食品等;如花生、玉米，大米、小麦、豆类、坚果类、肉类、乳及乳制品、水产品等均有黄曲霉毒素污染。其中以花生和玉米污染最严重。家庭自制发酵食品也能检出黄曲霉毒素，尤其是高温高湿地区的粮油及制品种捡出率更高。

三、黄曲霉菌的检测方法

　

　1、生物学方法

　　1)抑菌试验黄曲霉菌有抑制某些微生物生长的作用，故用其抑菌作用来测定黄曲霉菌的存在和含量。已经发现巨大芽胞杆菌和短芽胞杆菌对AFT最敏感。通过平皿中抑菌圈大小来衡量黄曲霉菌含量。

　　2 )荧光测定法根据黄曲霉菌在紫外光照射下可发出荧光的原理，将待检菌株接种于培养基中，28—30~C培养48～72小时，产生的毒素便浸入培养基中，在紫外灯光下照射培养基会呈现出特异的荧光。此法操作简便。对AFT最低检出量为5pg/ml。·

　　3)大白鼠试验法黄曲霉菌对大白鼠毒性最早出现损害的是肝脏，其受损范围广，而幼鼠最敏感，雄性幼鼠比雌性幼鼠敏感性更高，用100-150g大白鼠作急性中毒试验，一般3—4天死亡。

　　4)鸡胚试验

　　5)鸭雏试验鸭雏对黄曲霉菌非常敏感，致死性强，一般用一次剂量后72小时内死亡。

　　6)斑点试验本法用于检测真菌毒素致突变试验的一种有意义的方法。主要利用沙门氏菌/微粒体突变性来检测某些样品种AFT的存在与含量。

　　A先将鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型变种的菌悬液，与一定量肝组织匀浆混合作倾注平板。

　　B待凝固后，再将一定量被检物(含AFT)加在平板中央待黄曲霉菌往外围琼脂中扩散时，围绕中心点将出现密布的回复突变的菌落。

　　本法作为一种生物学检验法广泛应用于开发安全、有用的化学物质和检测食品或农产品中黄曲霉菌。

　

　2.免疫学方法

　　黄曲霉菌是分子量为312～346的二氢呋喃香豆素的衍生物，无免疫原性，不能引起抗体的产生，故必须与大分子化学基团或蛋白质偶联，成为完全抗原，方能引起免疫动物的抗体形成，然后利用血清学方法检测AFT。

　　由于黄曲霉菌的量一般都较低，因此，检测方法主要是敏感性较高的放射免疫测定法(RIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)。近几年来，国外已成功制备了测定B1的酶联免疫测定盒及检测乳中Ml含量的RIA检测盒。这两种检测盒都十分方便，而且快速准确。

四、黄曲霉菌的中毒诊断

1. 有进食可疑黄曲霉菌污染食物史。

2. 临床特点

①潜伏期较长。②中毒表现：胃部不适、腹胀、厌食、呕吐、肠鸣音亢进、一过性发热及黄疸等。

3. 实验室检查：

用酶联免疫吸附法(ELISA)、薄层层析法或高效液相层析法在可疑食物、患者血尿样中检测出黄曲霉毒素。

4.四季均可发生，但常在阴雨连绵的收获季节后多发。

5.儿童更易发生黄曲霉毒素中毒，根据历史资料分析来看，使人中毒的最危险年龄为1～3岁。

　

　6.中毒前驱表现为发烧、腹痛、呕吐、食欲减退等。

7.2～3周后很快发生中毒性肝病表现：

肝脏肿大，肝区疼痛，黄疸、脾大。腹水，下肢浮肿及肝功能异常。

　

　8.可有心脏扩大，肺水肿，甚至痉挛、昏迷等，多数患者在死前可有胃肠道大出血表现。

　

　9.实验动物临床毒性研究表明：

给动物喂食含黄曲霉毒素的饲料后，表现为渐进性食欲减退、口渴、便血、生长缓慢、体重减轻、皮肤出血、过度兴奋、黄殖、抽搐、角弓反张等。病理解剖可见肝脏弥漫性充血、出血利坏死等表现。